جین اور کلوننگ کے ساتھ کیا ویکٹر کرنا ہے
انوکل کلوننگ میں، ویکٹر ایک ڈی این اے انو ہے جو غیر ملکی جین (ے) کے منتقلی یا اندراج کے لئے کیریئر کے طور پر کسی اور سیل میں داخل ہوتا ہے، جہاں اسے نقل کیا جاسکتا ہے اور / یا اظہار کیا جا سکتا ہے. جینی کلوننگ کے لئے ویکٹرز ضروری اوزار میں شامل ہیں اور وہ سب سے زیادہ مفید ہیں اگر وہ کسی قسم کے مارکر جینی کو بایوڈکیکٹر انوڈنگ کو بطور انکوڈنگ کریں جو حیاتیاتی تشخیص میں ماپا جا سکتا ہے تاکہ میزبان حیض میں ان کی اندراج اور اظہار کو یقینی بنائے.
خاص طور پر، کلونٹنگ ویکٹر کلین مقصود مقاصد کے لئے غیر ملکی ڈی این اے ٹکڑے ٹکڑے کے ساتھ ڈال دیا وائرس، پلاسمیڈ یا خلیات (اعلی حیاتیات کی) سے لے جانے والے ڈی این اے ہے. چونکہ کلوننگ ویکٹر ایک حیاتیات میں مسلسل برقرار رکھا جا سکتا ہے، ویکٹر میں ایسی خصوصیات بھی شامل ہیں جو ڈی این اے کے آسان اندراج یا ہٹانے کی اجازت دیتا ہے. کلوننگ ویکٹر میں کلون ہونے کے بعد، ڈی این اے ٹکڑے ٹکڑے مزید اور دوسرے ویکٹر میں ذیلی کلون کیا جا سکتا ہے جو اس سے بھی زیادہ خاصیت کے ساتھ استعمال کیا جاسکتا ہے.
کچھ معاملات میں، وائرس بیکٹیریا کو متاثر کرنے کے لئے استعمال کیا جاتا ہے. ان وائرس کو بیکٹیریافورس یا فیز کہا جاتا ہے، مختصر طور پر. جانوروں کے خلیوں میں جین متعارف کرنے کے لئے ریٹروائرس بہترین ویکٹر ہیں. پلاسمس، جو ڈی این اے کے سرکلر ٹکڑے ٹکڑے ہیں، سب سے عام طور پر استعمال شدہ ویکٹر بیکٹریی خلیوں میں غیر ملکی ڈی این اے متعارف کرانے کے لئے استعمال کیا جاتا ہے. وہ اکثر اینٹی بائیوٹک مزاحمت جینس لے جاتے ہیں جو اینٹی بائیوٹک پیٹرول پر بیٹھے پلاسمڈ ڈی این اے کے اظہار کے لئے استعمال کیا جا سکتا ہے.
پلانٹ کے خلیات میں جین کی منتقلی عام طور پر مٹی کے بیکٹیریم ایوروبیکٹیریم tumefaciens کا استعمال کرتے ہوئے انجام دیا جاتا ہے، جس میں ایک ویکٹر کے طور پر کام کرتا ہے اور میزبان سیل میں ایک بڑا پلاسمڈ داخل کرتا ہے. اینٹی بائیوٹیکٹس موجود ہیں جب کلوننگ ویکٹر پر صرف ان خلیوں میں اضافہ ہوتا ہے.
کلونٹنگ ویکٹر کے بڑے اقسام
ویکٹروں کی چھ اہم اقسام ہیں:
- پلاسمی. سرکلر آٹومیومومومل ڈی این اے جو خود بخود بایکٹیریل سیل کے اندر نقل کرتا ہے. پلاسمڈ عام طور پر ایک اعلی کاپی نمبر ہے، جیسے PUC19، جس میں ہر سیل 500-700 کاپیاں ہیں.
- مرحلہ بیکٹیریوفج لامبہ کے حاصل کردہ لکیری ڈی این اے انوولس. غیر ملکی ڈی این اے کے ساتھ اس کی زندگی سائیکل کو روکنے کے بغیر تبدیل کیا جاسکتا ہے.
- برہمانڈیی ایک اور سرکلر آٹومومیومومال ڈی این اے انو جو پلاسمیڈ اور فوج کی خصوصیات کو یکجا کرتا ہے.
- بیکٹیریا مصنوعی کروموزوم. بیکٹیریل مینی ف پلاسمائڈز پر مبنی ہے.
- خمیر مصنوعی Chromosomes. یہ ایک مصنوعی کروموسوم ہے جس میں ٹومومیرس (کروموزوم کے اختتام پر ڈسپوزایبل بفر شامل ہوتے ہیں جو سیل ڈویژن کے دوران کاٹ رہے ہیں) کے نقل و حمل کے ساتھ، ایک خمیر سینٹرومیر (ایک کرومیوموم کا حصہ ہے جو بہن کرومیٹائڈز یا ڈاڈ سے تعلق رکھتا ہے)، اور ایک منتخب مارکر خمیر خلیوں میں شناخت کے لئے.
انسانی مصنوعی Chromosome. اس قسم کی ویکٹر ہے انسانی خلیات میں جین کی ترسیل کے لئے ممکنہ طور پر مفید ہے، اور اظہار مطالعہ کے لئے ایک آلہ اور انسانی کروموزوم فنکشن کا تعین. یہ بہت بڑا ڈی این اے ٹکڑا لے سکتا ہے.
تمام انجنیئر ویکٹروں کی نقل (ایک ریپولیٹر)، ایک کلونٹنگ سائٹ (واقع ہے جہاں غیر ملکی ڈی این اے کی اندراج کو بھی غیر ضروری مارکروں کی نقل و حرکت کو روکنے یا غیر فعال کرنا)، اور ایک منتخب شدہ مارکر (عام طور پر ایک جینی جو اینٹی بائیوٹک کے خلاف مزاحمت فراہم کرتا ہے).